大肠杆菌广泛存在于自然环境中,如不干净的水中,或没煮熟的肉上,人们一旦感染了其中的某些类型,会引起腹泻、发热等症状。过去想要知道是否感染大肠杆菌,往往要等上好几天,随着医学的进步,现在有很多快速检测的方法,快的几分钟就能出结果。下面就为大家介绍这些实用方法。
细菌培养
过去想要找出大肠杆菌就像大海捞针,医生们将样本(如一滴水、一小块食物)涂抹在特制的营养琼脂平板上,随后放入恒温的培养箱,耐心等待24~48小时。如果平板上长出有特定光泽的小圆点,就可以锁定目标。为了确保结果无误,还得挑取可疑菌落进行生化“考试”(如观察它能不能发酵特定糖类产酸产气)或更高级的基因检测。这个方法的优点是结果可靠,但缺点也很明显——耗时太长。
免疫学快筛
1. 胶体金试纸条 这可能是最亲民、速度最快的侦探工具。把处理过的液体样本滴在试纸条加样孔,液体会带着样本中的细菌向前流动。当流经“检测线”区域时,如果存在目标大肠杆菌,它表面的抗原就会被预埋在这里的抗体“钥匙”精准抓住,瞬间显出一道红色条带。该方法的优点是出结果快,只需5~15分钟,操作简单,无需复杂仪器,价格也亲民,特别适合家庭厨房快速验水验菜、小餐馆自检食材,或野外水源初步筛查。但该方法的缺点是它只能告诉你“有”或“没有”,具体数量多少、是否还有其他杂菌,就难以判断了。
2. 酶联免疫吸附试剂盒 该方法也是利用抗体抗原的精准结合,不同之处在于,结合后会产生颜色或荧光变化,需要用专业仪器读取强度,能对细菌数量进行大致定量。该方法通常1~4个小时出结果,比培养法快得多,灵敏度和特异性都不错,能一次检测大量样本,兼顾了速度和准度,适合对结果要求稍高、有些专业设备的场景,如中小型食品加工企业、养殖场的水质监控。该方法的不足之处是需要移液操作和仪器,成本也稍高。
分子生物学快检
1. 聚合酶链式反应(PCR) 配合荧光染料或特殊探针,仪器能在反应过程中实时“看到”信号增长,1~3小时内就能确定菌是否存在,甚至精确算出数量。优点是超级灵敏和特异,即使样本里只有极个别的目标大肠杆菌,PCR也能把它特定的基因片段复制上百万倍,变得极易探测,还能区分不同致病型的大肠杆菌,结果权威。缺点是需要专业PCR仪、精密温控设备,操作要求高,试剂成本也贵,一般只用于大医院实验室、疾控中心或大型第三方检测机构的精准溯源或疫情调查。
2. 环介导等温扩增(LAMP) 该方法最大的革命在于全程恒温,不需要昂贵的变温PCR仪,一个普通水浴锅甚至小金属浴就能搞定。扩增速度快,结果可通过肉眼观察溶液是否变浑浊或用荧光染料判断颜色变化,非常适合现场快速筛查。优势是设备要求低、速度极快、结果肉眼可见,在基层卫生院、食品企业现场,甚至灾害应急现场都能大显身手,局限是设计高性能引物难度稍高,有时可能出现非特异扩增干扰。
永州市东安县疾病预防控制中心
张安欣